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Laboratoire et biomarqueurs

De la goutte de sang aux marqueurs moléculaires

Diagnostic, hématologie, biologie moléculaire et sérologie : un plateau d’analyses complet pour caractériser l’infection et l’immunité.

Procédures de laboratoire

Quatre familles d’analyses

Détection de Plasmodium falciparum

Un test de diagnostic rapide basé sur HRP2 sera utilisé pour la prise en charge immédiate des enfants.

Les lames colorées au Giemsa seront lues indépendamment par deux microscopistes. En cas de discordance, une troisième lecture sera effectuée et le résultat médian sera retenu.

Mesure de l’hémoglobine

La concentration d’hémoglobine sera mesurée avec un appareil Hemocue, directement sur le terrain à partir d’une goutte de sang capillaire.

Cette mesure permet d’évaluer l’anémie légère, modérée ou sévère, et de l’associer à la parasitémie et à l’exposition aux interventions.

Marqueurs moléculaires de résistance

Des gouttes de sang seront collectées sur papier filtre Whatman No3, séchées et conservées avec dessiccant pour l’analyse ultérieure des marqueurs de résistance.

Les analyses porteront sur la résistance à la sulfadoxine-pyriméthamine et à l’amodiaquine, après plusieurs années d’administration de la CPS.

Sérologie du paludisme

Les anticorps dirigés contre plusieurs antigènes pré-érythrocytaires et sanguins de Plasmodium falciparum seront mesurés avec une plateforme Luminex.

Ces mesures permettront de comprendre comment l’exposition passée à la CPS ou au RTS,S / AS01E influence la réponse immunitaire et le risque ultérieur de paludisme.

Microscopie

Une lecture rigoureuse et contrôlée

Les lames sont lues indépendamment par deux microscopistes ; une troisième lecture tranche en cas de discordance.

01

TDR HRP2

Test de diagnostic rapide pour une prise en charge immédiate.

02

Coloration au Giemsa

Préparation et coloration des lames de frottis sanguin.

03

Double lecture

Lecture indépendante par deux microscopistes.

04

Troisième lecture

En cas de discordance, une lecture supplémentaire est réalisée.

05

Résultat médian

Le résultat médian des lectures est retenu.

Biomarqueurs

Ce que nous mesurons sur chaque échantillon

Diagnostic rapide

Antigène HRP2

Détection immédiate de Plasmodium falciparum par TDR.

Microscopie

Parasitémie

Quantification des parasites par lecture de lames au Giemsa.

Hématologie

Hémoglobine

Mesure par Hemocue pour évaluer l’anémie.

Biologie moléculaire

Marqueurs de résistance

pfcrt, pfmdr1, dhfr, dhps sur papier filtre Whatman No3.

Sérologie

Anticorps anti-Pf

Panel d’antigènes mesuré sur plateforme Luminex.

Nutrition

Anthropométrie

Paramètres de croissance pour évaluer la malnutrition.

Résistance moléculaire

Marqueurs de résistance aux antipaludiques

Collectés sur papier filtre Whatman No3, les échantillons permettent de suivre la résistance après plusieurs années de CPS.

MarqueurCibleRôle
pfcrtTransporteur de la vacuole digestiveRésistance à la chloroquine et à l’amodiaquine
pfmdr1Transporteur multidrogueModulation de la sensibilité à plusieurs antipaludiques, dont l’amodiaquine
dhfrDihydrofolate réductaseRésistance à la pyriméthamine
dhpsDihydroptéroate synthaseRésistance à la sulfadoxine

Haplotypes de pfcrt étudiés

CVMNK

Haplotype de type sauvage de pfcrt, associé à la sensibilité.

CVIET

Haplotype associé à la résistance à la chloroquine et à l’amodiaquine.

SVMNT

Haplotype associé à la résistance à l’amodiaquine.

Cibles de résistance

  • Résistance à la sulfadoxine-pyriméthamine
  • Résistance à l’amodiaquine

Comment ces données sont-elles gérées ?

Découvrez la chaîne de gestion des données, du registre de laboratoire à l’analyse statistique.

Gestion des données